Expresión de autoantígenos recombinantes en el sistema baculovirus-larvas de insectos. Aplicación en el diagnóstico e inmunoterapia de Diabetes Mellitus Autoinmune.

Investigadora a cargo: Dra. Aldana Trabucchi

La Diabetes Mellitus (DM) tipo 1 es una enfermedad autoinmune órgano-específica dependiente de células T. La presencia de autoanticuerpos circulantes específicos para proteínas de los islotes pancreáticos es indicio de la autoinmunidad subyacente que precede a la enfermedad clínica. La medida combinada de anticuerpos anti-insulina/proinsulina (IAA/PAA), anti-glutamato decarboxilasa (GADA), anti-proteína tirosina fosfatasa IA-2 (IA-2A) y anti-transportador de ZnT8 (ZnT8A) identifica a más del 90% de los pacientes en debut o en riesgo de desarrollar diabetes. Los autoanticuerpos son de utilidad en el apoyo diagnóstico de las formas autoinmunes de DM. El objetivo del presente plan de trabajo es expresar moléculas quiméricas IA-2/GAD y ZnT8/GAD que combinen las regiones inmunodominantes de los autoantígenos en el sistema baculovirus-larvas de insecto para ser utilizadas en inmunoensayos no radiométricos que permitan la detección combinada de los diversos marcadores presentes en DM autoinmune. La distinción entre uno u otro marcador no posee consecuencias en la estrategia terapéutica en el diagnóstico de la DM. De esta manera, el tamizaje en la población general de individuos de riesgo con marcadores positivos, se vería beneficiado empleando la estrategia analítica basada en las quimeras propuestas, ya que se podrán detectar, en un único paso de análisis, los autoanticuerpos GADA, IA-2A y ZnT8A, considerados los más prevalentes.Asimismo, dichas quimeras se emplearán para ensayos preliminares de inducción de tolerancia en modelos animales, en los cuales se evaluará la capacidad de proliferación de células T frente a las mismas. Se plantean ensayos in vitro de proliferación de células T utilizando esplenocitos provenientes de ratones NOD aplicando las distintas quimeras como moléculas antigénicas, y la evaluación del contexto inflamatorio producido. Estos ensayos representan una etapa preliminar a estudios futuros de inducción de tolerancia. Una combinación de múltiples antígenos es una idea lógica para llevar a cabo una inmunoterapia donde se podrían observar efectos complementarios y/o sinérgicos, siendo esta una estrategia interesante para ser evaluada en primera instancia en modelos animales de la enfermedad.